게시자: TS. Nguyen Dac Tu, Vinmec 하이테크 센터의 제품 품질 평가 팀장 및 석사. Mai Thi Hien, Vinmec High-Tech Center 제품 품질 분석가

탯줄 혈액은 출생 후 아기의 탯줄에서 수집된 다양한 유형의 혈액 세포의 혼합물입니다. 제대혈에는 적혈구, 백혈구, 혈소판과 같은 성숙한 혈액 세포 외에도 다른 단계의 조혈 줄기 세포와 조혈 전구 세포도 함께 포함되어 있습니다. 이러한 특성으로 인해 조혈모세포는 혈액암, 면역암, 유전암 및 많은 혈액암의 치료에 널리 사용됩니다. 이 치료법을 조혈모세포 이식이라고 합니다.

다른 줄기세포와 마찬가지로 조혈모세포 치료 적용을 위한 두 가지 중요한 특성, 즉 스스로를 대체하기 위해 증식하는 능력(재생 가능)과 다음 역할을 하는 성숙한 혈액 세포로 분화하는 능력이 있습니다. 적혈구, 백혈구, 혈소판(분화). 조혈모세포를 이용한 치료법의 원리는 손상된 체세포를 대체할 수 있는 기능적인 성체세포로 분화시키는 것이다.

이러한 조혈모세포의 기능과 분화상태를 평가하기 위해 count assay를 시행합니다. 조혈모세포 분화 클러스터 (Cloning Forming Unit), 줄여서 CFU라고 합니다. 이 분석은 모든 유형의 혈액 세포의 분화 및 성숙에 필요한 사이토카인을 포함하는 특수한 유형의 반액체 배지를 사용합니다. 이 배지에서 각 조혈 줄기 세포는 자체 복제하고 색상, 크기, 클러스터 형태 및 클러스터 내의 세포가 다른 CFU 클러스터 유형으로 분화합니다. 이러한 특성을 바탕으로 적혈구, 백혈구 또는 혼합 세포 유형으로 분화된 클러스터를 구별할 수 있습니다.

조혈모세포에서 분화된 클러스터의 형태 및 색상 특성
그림 1. 조혈모세포에서 분화된 클러스터의 형태 및 색상 특성

14일 배양 후 CFU 클러스터를 계수하고 구별하는 과정은 도립현미경으로 수동 계수하는 방법과 스템셀에서 제조한 자동 계수 장치인 Stem Vision을 사용하는 2가지 방법으로 할 수 있다. 수동 카운팅 방법을 수행하려면 기술자가 클러스터 크기, 클러스터 색상, 셀의 셀 크기 및 색상에 따라 클러스터 유형을 구별하는 데 많은 경험이 필요합니다. 다음은 조혈 줄기 세포 분화의 몇 가지 특징적인 클러스터입니다.

  1. CFU-GEMM(과립구, 적혈구, 대식세포 및 거대핵구)은 가장 덜 성숙하고(가장 높은 줄기 세포 잠재력을 가짐) 가장 분화 가능성이 높은 단일 조혈 줄기 세포로 구성된 클러스터입니다. 그것은 조혈 동안 많은 다른 유형의 세포로 분화하는 능력이 있습니다.
  2. CFU-GM(과립구 및 대식세포)은 CFU-GEMM 클러스터를 구성하는 세포보다 분화 가능성이 낮은 조혈모세포로 구성된 클러스터입니다. 그 세포는 과립구와 대식세포로만 분화할 수 있습니다.
  3. CFU-G(과립구) 및 CFU-M(대식세포)은 과립구 또는 대식세포로만 분화할 수 있는 세포로 구성됩니다.
  4. CFU-E와 BFU-E(Erythrocytes)는 적혈구만으로 분화할 수 있는 세포, 과립구로만 분화하는 세포에서 CFU-G, 과립구로만 분화하는 세포에서 CFU-M으로 대식세포로 구성된다. 이러한 유형의 클러스터를 생성하는 조혈 줄기 세포는 어느 정도 성숙되었으므로 가장 낮은 분화 잠재력을 갖는 것으로 간주될 수 있습니다.