세침 흡인 표본에서 세포학적 진단에서 세포 질량 기술의 역할

게시자: Nguyen Thi Hang 박사 – 병리과 – 실험실 부서 – Vinmec Times City International General Hospital

표재성 또는 심부 병변에 대해 미세침 흡인 세포검사(FNAC)를 수행하는 것이 실제로 점점 보편화되고 있으며, 시간을 절약하고 상세한 진단 절차입니다. 저렴한 비용으로 빠르고 정확한 진단을 제공합니다.

진단 세포학은 다음을 포함하는 세포를 해석하는 과학입니다. 표면 상피에서 흘러나온 세포와 다양한 조직에서 제거된 세포. 세포 차단 기술 질 도말, 가래, 소변, 체액 등과 같은 탈락된 세포의 샘플링 및 검사를 포함한 다양한 방법으로 수행할 수 있습니다. 세포의 브러시 샘플링, 긁기 또는 문지르기 기술. George N Papanicolaou는 1928년에 암과 전암을 탐지하는 도구로 세포학적 방법을 도입했습니다.

정확도 수준 세포학적 검사 다양한 신체 부위에서 채취한 샘플의 품질은 샘플링 품질, 샘플 취급, 염색 및 재료 샘플 해석에 크게 좌우됩니다. 위의 단계 중 하나라도 만족스럽지 않으면 세포학적 진단의 품질에 부정적인 영향을 미칩니다. 평가가 어려운 경우가 있으므로 세포 시료 처리 완료 후 과잉 물질 시료를 다음과 같이 처리 및 파라핀화할 수 있습니다. 세포 차단 기술, 이를 통해 소량의 세포 물질을 회수할 수 있습니다.

Elizabath P Mathew와 Vijayalakshmi Nair의 연구에서 세포 덩어리의 민감도, 특이도 및 진단 정확도는 각각 71.11%, 100% 및 71.73%였습니다. FNA 스키마에 대한 이러한 메트릭은 각각 62.22%, 100% 및 63.04%입니다.

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1986년 1월부터 1987년 8월까지 순차적으로 시행한 100건의 조직검사 기록을 후향적으로 평가한 KT Brown et al.의 연구에서 84명의 분석결과가 있는 환자를 포함하여 도말세포와 종괴세포, 임상적, 외과적 비교를 통해 분석하였다. 연구 결과에 따르면 64/84 생검(76%)에서 악성 세포가 있었고 11건에서 양성 과정의 증거가 있었고 이 중 9건이 진단되지 않은 것으로 나타났습니다. 흑색종 세포는 흑색종 세포가 있는 55/64 사례(86%)의 경우 세포학에서 진단된 반면, 다른 9명의 환자에서는 흑색종 세포가 대변 세포 질량에서만 나타났습니다. 양성 질환군에서 세포학에서 진단된 경우는 1예(9%)에 불과했지만 세포학에서는 진단되지 않았습니다. 본 연구에서는 도말 처리 후 잔존 검체의 세포 덩어리를 분석하면 진단 정확도를 최대 14%까지 높일 수 있다고 결론지었습니다.

세포괴사 기법의 장점은 잘 알려져 있지만 베트남에서는 아직 일반적으로 사용되지 않고 널리 사용되지 않습니다.

검체에 흩어져 있는 단세포를 농축 가는 바늘 흡인 일상적인 조직학 과정처럼 옮기고, 성형하고, 자르고, 염색할 수 있는 블록으로 만들어 환자의 몸에서 최대한 많은 표본을 구할 수 있습니다.

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3.1 준비

의사, 기술자;

수단 및 화학 물질:

• 유리 시험관 크기 10 x 1.6 cm;
• 포르몰 중성 10%, 트롬빈 ​​또는 한천 3%;
• 원심분리기, 카세트, 슬라이드, 조직학적 래퍼(비접착제);
• 작은 나무 막대기, 솜(방수형), 냉장고, 전자레인지,
• 일상적인 조직학적 절차의 기술 도구 및 화학물질(H&E, PAS…).

환자: 환자는 미세침 흡인(FNA) 절차를 거쳐 세포학용 샘플을 수집했습니다.

검사지 : 환자의 행정정보(이름, 나이, 병상번호, 병실번호, 진료과), 임상진단, 임상 및 검사실 정보 요약, 세침흡인세포검사(cellblock FNA) 검사 요청서 작성, 표본 수집 날짜 및 시간.

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3.2 취해야 할 조치

표본을 취하십시오:

• FNA 표본은 임상 부서 또는 병리 부서에서 흡인되었습니다.
• 검체를 채취한 후 1개 부분을 슬라이드 위로 펌핑하여 1-2개의 슬라이드 세포 도말을 만들고 나머지(바늘 코어 또는 실린더의 과도한 유체)는 5-10 ml로 세척합니다. formol 10%(지지대 사용 필요한 경우 바늘), 시험관에 넣고 즉시 병리학과 – 세포학으로 보냅니다.
• 더 많은 환자 샘플을 얻기 위해 슬라이드를 도말하는 대신 바늘 삽입, 한 번 더 흡인, 튜브에 직접 주입 및 코어 세척을 수행할 수 있습니다.

메모:

• 세척용 10% 중성완충포몰이 없을 경우 생리식염수를 대신 사용할 수 있으나 세척 후 검체를 즉시 병리과로 보내야 한다.
• 환자를 흡인하기 위해 포르말린으로 세척한 바늘을 사용하지 마십시오.

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수행 기술

• 1단계: FNA 샘플이 포함된 시험관을 2000rpm에서 10분 동안 원심분리기에 넣습니다.
• 2단계: 상층액을 제거하여 세포 침전물을 제거한 다음 세포 잔류물을 10% 중성 완충 포몰에 1시간 이상 고정합니다.
• 3단계: 필요한 경우 표본을 다시 2000rpm에서 10분 동안 원심분리합니다( 표본이 고체 덩어리를 형성한 경우 절차를 2단계에서 4단계로 직접 전환할 수 있음).
• 4단계: 폐수 용기에 포르몰을 제거합니다. 시험관에 소량의 트롬빈 또는 3% 한천(증류수 100ml에 녹인 한천분말 3g)을 녹인(중온에서 10초간 전자레인지)를 가한다. 트롬빈이나 한천이 굳을 때까지 기다리십시오. 필요한 경우 한천이 더 빨리 굳을 수 있도록 냉장 보관합니다. 트롬빈 또는 한천은 세포 덩어리의 견고성을 강화하는 효과가 있습니다. 참고: 한천을 튜브에 넣을 때 기포가 없는지 확인하십시오.
• 5단계: 작은 나무 막대기를 사용하여 튜브에서 세포 덩어리를 제거하고 종이 위에 놓습니다(조직학 실험실에서 사용할 수 있는 붙지 않는 종이). 이 종이에 세포 덩어리를 싸서 환자의 이름과 세포 블록 번호가 표시된 카세트에 넣으십시오.
• 6단계: 세포 덩어리가 있는 카세트를 일상적인 조직학적 절차에 주입합니다.
• 7단계: 세포 덩어리에서 절단된 조각을 Hematoxylin – Eosin(H&E) 및 특수 염색(Periodic acid – Schiff(PAS), mucicarmine…) 및 필요에 따라 면역조직화학 염색으로 염색합니다. 슬라이스는 일반적으로 두께가 3-5 μm입니다.

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결과에 대한 논평:

• 검토자: 병리학 박사 – 세포학.
• 세포 덩어리는 세포 도말보다 조직 구조를 더 잘 보존하여 동일한 슬라이드의 다중 절제, H&E 염색, 특수 염색 및 염색이 가능합니다. 면역조직화학 진균, 악성 병변 또는 원발성 종양의 기원을 찾는 것과 같은 다양한 유형의 병변을 진단할 수 있습니다.

3.2 오류 및 처리

• FNA 검체의 수는 일반적으로 매우 적으므로 항상 1.6 x 10 cm KT 시험관(실험실의 원심분리대 랙에 맞는 유형)을 사용하여 침심 세척액을 보관하는 것이 좋습니다. 많은 유형으로 변경하기 위해 원심분리기에 맞는 튜브로 인해 기술 과정에서 표본이 손실됩니다.
• 기술적인 과정에서 다단계의 공정으로 인해 환자가 혼동을 일으킬 수 있고, 시험관이 부러지거나, 검체를 분실할 가능성이 있습니다… 불필요한 오류를 피하기 위해 비교하십시오.

참조 소스:

1. 영상 유도 미세 바늘 흡인 세포학의 세포 병리학 적 평가에서 세포 차단의 역할. Elizabat P Mathew와 Vijayalakshmi Nair. 7-9월; 34(3):133–138., sl : J Cytol., 2017.
2. 미세 바늘 흡인 생검에서 세포학적 분석: 도말 대 세포 차단. KT 브라운 1, RK 풀브라이트, AM Avitabile, B Bashist. sl : AJR Am J Roentgenol. , 1993년 9월, Vols. 161(3):629-31.
3. 세포 덩어리 기술에 의한 흉막액의 세포학적 진단. Nguyen Thi Hang, Vu Hoang Anh, Nguyen Thu Huong, Bui Manh Thang. 하노이 : Journal of Clinical Medicine, 2012.